復方黃連素片－鹽酸小檗堿的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復方黃連素片中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥復方黃連素片。

供試品細粉溶于沸水中，加鹽酸處理，上清液用流動相稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處檢測鹽酸小檗堿的峰面積，計算出其含量。

1.乙腈

2.稀鹽酸 取鹽酸234mL,加水稀釋至1000mL

3. 磷酸二氫鉀溶液，0.033mol/L

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液 = 40 60

2.2 檢測波長：265nm

2.3 柱溫：室溫

1.稱取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，求出平均片重，研細，精密稱取總重量的1/20，為供試品。

2.對照品溶液的制備

精密稱取在100°C干燥的鹽酸小檗堿對照品約25mg，置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2ml，用流動相稀釋至刻度，搖勻（每1mL含鹽酸小檗堿0.008mg)。

3,供試品溶液的制備

供試品置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，離心（每分鐘轉(zhuǎn)速位4000轉(zhuǎn))，精密量取上清液2ml，置25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻,作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p534。