本研究用間接ELISA法檢例患者和健康輸血員血清中抗HpIgA、IgG同時(shí)還檢測(cè)了胃粘膜中的Hp，以探討Hp抗體測(cè)定的臨床意義。
1 材料和方法
1.1 材料
本組217例患者經(jīng)胃鏡及胃粘膜組織學(xué)診斷為十二指腸球部潰瘍（DU)48例，胃潰瘍（GU)27例，慢性萎縮性胃炎（CAG)18例，慢性清表性胃炎（CSG)96例，復(fù)合性潰瘍（CU)7例，胃癌（GCa)14例，胃粘膜正常2例。慢性胃炎中活動(dòng)性胃炎（ACG)54例，非活動(dòng)性（NACG)60例。所有患者均抽取空腹靜脈血，此外還收集了80例健康輸血員血清測(cè)抗HpIgA、IgG。
1.2 方法
�、傥刚衬�(nèi)Hp菌檢測(cè)活檢粘膜直接涂片檢查及Hp的分離培養(yǎng)鑒定均參照張振華所報(bào)道的方法。②ELISA方法：從患者胃粘膜中培養(yǎng)出的7株Hp菌分離純化，超聲粉碎后在4℃下1500g離心30min，取上清蛋白定量后作抗原。用50mg/ml的抗原包被聚苯乙稀反應(yīng)板，用間接ELISA法測(cè)定，每板均設(shè)標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性和陰性對(duì)照，將兩者OD值用作為質(zhì)控，每板此值之差在±0.5范圍內(nèi)。結(jié)果用特測(cè)標(biāo)本OD值與標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性O(shè)D值之比來(lái)表示，該比值在血清IgA≥0.6，在IgG≥0.5為陽(yáng)性，在胃液IgA≥0.145為陽(yáng)性。③吸收抑制試驗(yàn)：用7例在ELISA試驗(yàn)中高效價(jià)IgA、IgG的Hp感染者的血清混合后從1：10開(kāi)始對(duì)倍稀釋至1：160，然后分別用Hp、空腸彎曲菌（CJ)及大腸桿菌完整的細(xì)菌和Hp抗原吸收后，按上述方法做ELISA。
計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料用t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
Hp陽(yáng)性患者血清中抗HpIgA、IgG含量均顯著高于Hp陰性者（P＜0.01)。與細(xì)菌學(xué)比較其敏感性分別為92.1％和95.7％，特異性分別為91.1％和88.5％，符合率分別為71.7％和93.2％（表1)�？梢钥闯霾煌膊≈g的血清抗HpIgA和LgG含量有顯著差異（P＜0.01)，兩組比較發(fā)現(xiàn)血清IgA含量在ACG組顯著高于除CU外的其它各組（P＜0.05，P＜0.01)，消化性潰瘍各組顯著高于NACG組（P＜0.01)，2例組織學(xué)正常者IgA、IgG分別為0.44和0.37，80例健康輸血員血清抗HpIgA，IgG的含量和陽(yáng)性率均顯著低于ACG，GU，DU及GCa組（P＜0.01，P＜0.05)。研究表明，血清Hp抗體與胃炎的嚴(yán)重程度有關(guān)，中重度胃炎血清抗HpIgA，IgG的陽(yáng)性率為82.4％和79.0％，顯著高于輕度胃炎的45.6％59.7％（P＜0.01，P＜0.05)。但Hp抗體含量和陽(yáng)性率在淺表性胃炎和萎縮性胃炎之間無(wú)顯著差異（P＜0.05表2)。
表1 胃粘膜內(nèi)Hp和血清Hp抗體的比較
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胃粘膜Hp |
n |
IgA |
IgG | ||
|
X±S |
陽(yáng)性數(shù)（％) |
X±S |
陽(yáng)性數(shù)（％) | ||
|
陽(yáng)性 |
139 |
0.79(0.19) |
128(92.1) |
0.65(0.13) |
133(95.7) |
|
陰性 |
78 |
0.50(0.1) |
7(9.0) |
0.45(0.13) |
9(11.5) |
表2 各種胃部疾病血清抗HpgA，IgG比較
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病 種 |
n |
IgA |
IgG | ||
|
X±S |
陽(yáng)性數(shù)（％) |
X±S |
陽(yáng)性數(shù)（％) | ||
|
ACG |
54 |
0.82(0.2) |
49(90.7) |
0.69(0.1) |
51(94.4) |
|
NGCG |
60 |
0.53(0.2) |
22(36.7) |
0.47(0.1) |
23(38.3) |
|
GU |
27 |
0.71(0.2) |
19(70.7) |
0.59(0.2) |
20(74.1) |
|
DU |
48 |
0.71(0.2) |
31(64.6) |
0.57(0.2) |
34(70.8) |
|
CU |
7 |
0.86(0.4) |
5(71.2) |
0.58(0.1) |
5(71.2) |
|
GCa |
14 |
0.68(0.2) |
8(57.1) |
0.55(0.1) |
8(57.1) |
|
RG |
5 |
0.54(0.1) |
120.0 |
0.52(0.2) |
1(20.0) |
|
輸血員 |
80 |
0.47(0.2) |
27(33.8) |
0.43(0.2) |
25(31.3) |
Hp陽(yáng)性患者胃液中抗HpIgA顯著高于Hp陰性者（P＜0.01)，與細(xì)菌學(xué)結(jié)果比較敏感性，特異性與符合率分別為96.4％92.9％和95.3％（表3)。
表3 胃粘膜內(nèi)Hp的檢出率和胃液抗HpIgA的比較
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胃粘膜 |
n |
X±S |
陽(yáng)性數(shù) |
|
陽(yáng)性 |
57 |
0.438（0.234) |
55（96.5) |
|
陰性 |
28 |
0.101（0.045) |
2（7.1) |
不同疾病之間胃液抗HpIgA含量有顯著差異（表4，P＜0.01)，兩組比較發(fā)現(xiàn)ACG組、消化性潰瘍各組和CGa組顯著高于NACG組（P＜0.05)。此外中重度胃炎胃液抗HpIgA的陽(yáng)性率為76.6％，顯著高于累度胃炎的40.0％（P＜0.05)。
表4 各種胃部疾病胃液抗HpIgA結(jié)果
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病種 |
n |
X±S |
陽(yáng)性數(shù)（％) |
|
ACG |
24 |
0.497（0.252) |
22（91.7) |
|
NACG |
21 |
0.162（0.161) |
7（33.3) |
|
GU |
15 |
0.281（0.212) |
10（66.7) |
|
DU |
15 |
0.269（0.208) |
12（80.0) |
|
CU |
3 |
0.567（0.298) |
2（66.7) |
|
GCa |
5 |
0.502（0.159) |
4（80.0) |
無(wú)論是完整的Hp菌還是超聲粉碎提取的Hp抗原與Hp陽(yáng)性血清共同溫育后都能使血清中抗HpIgA和IgG效價(jià)明顯下降，而用大腸桿菌和Cj吸收后的血清抗體僅有少許下降，此結(jié)果證明本試驗(yàn)具有特異性。
3 討論
本研究發(fā)現(xiàn)Hp陽(yáng)性者血清抗HpIgA，IgG的陽(yáng)性率顯著高于Hp陰性者。與細(xì)菌學(xué)檢查比較其敏感性、特異性和符合率高達(dá)95％～88％，與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道相似。吸收抑制試驗(yàn)證實(shí)本研究所用ELISA法測(cè)得的血清Hp抗體可定為特異的針對(duì)Hp的免疫反應(yīng)。因此，ELISA陽(yáng)性結(jié)果強(qiáng)有力支持Hp感染。本研究表明，血清中抗HpIgA、IgG密切反映了消化性潰瘍的存在和胃炎的組織學(xué)變化。血清Hp抗體在ACG組的陽(yáng)性率達(dá)90％以上，在消化性潰瘍?yōu)?7％和71％，而在NACG中為36％和38％。健康輸血員血清中抗Hp抗體顯著低于消化性潰瘍和慢性胃炎。此外，中重度胃炎血清中Hp抗體的含量和陽(yáng)性率顯著高于輕度胃炎。上述結(jié)果表明Hp的血清檢測(cè)可用來(lái)診斷Hp感染和用作篩選胃鏡檢查患者，這將有助于那些不宜做胃鏡檢查患者的診斷，并可用于Hp感染的流行病學(xué)調(diào)查及評(píng)價(jià)和追蹤抗Hp治療效果。
Hp寄居不但可引起宿主的全身免疫反應(yīng)，而且引起胃腸道的局部免疫反應(yīng)。本研究顯示，Hp陽(yáng)性者胃液中抗HpIgA顯著高于Hp陰性者，與細(xì)菌學(xué)比較其敏感性、特異性和符合率高達(dá)96％至92％，高于國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道。本研究結(jié)果還表明，胃液中抗HpIgA與消化性潰瘍及胃炎的存在和組織變化密切相關(guān)。ACG組及消化性潰瘍各組陽(yáng)性率顯著高于NACG組，中重度胃炎顯著高于輕度胃炎。局部分泌性IgA的確切作用尚不清楚。本研究胃液內(nèi)抗HpIgA檢測(cè)的敏感性、特異性均高于血清學(xué)試驗(yàn)，這說(shuō)明局部免疫反應(yīng)與Hp感染的關(guān)系比全身免疫反應(yīng)更為密切，故檢測(cè)胃液內(nèi)抗HpIgA可作為血清學(xué)試驗(yàn)的補(bǔ)充，兩者結(jié)合可進(jìn)一步提高Hp感染的免疫學(xué)診斷準(zhǔn)確性。
謝勇 王崇文 祝金泉 張昆和 周美珍
江西醫(yī)學(xué)院第二附院（南昌 330006)
