復(fù)方鹽酸阿米洛利片—鹽酸阿米洛利和氫氯噻嗪的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方鹽酸阿米洛利片中鹽酸阿米洛利和氫氯噻嗪的含量。

本方法適用于復(fù)方鹽酸阿米洛利片。

供試品加甲醇超聲提取后，制成水溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長286nm處檢測(cè)鹽酸阿米洛利和氫氯噻嗪的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸緩沖液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按炔諾酮峰計(jì)算不低于2000。炔諾酮與炔雌醇峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：磷酸緩沖液 甲醇 水=4 25 71

2.2 檢測(cè)波長：286nm

2.3 柱溫：室溫

1. 磷酸緩沖液

取磷酸二氫鉀13.6g，加水80mL溶解后，加磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0，再加水至100mL)

2. 稱取供試品

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約適量（約相當(dāng)于鹽酸阿米洛利5mg)。

3. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸阿米洛利對(duì)照品適量，用甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含有鹽酸阿米洛利1mg的溶液。精密稱取氫氯噻嗪對(duì)照品100mg，置100mL量瓶中，加甲醇20mL使溶解，并加鹽酸阿米洛利對(duì)照品溶液10mL，加0.1mol/L鹽酸溶液4mL，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

將上述供試品置于50mL量瓶中，加甲醇15mL與0.1mol/L鹽酸溶液2mL，超聲處理使溶解，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長286nm處測(cè)定鹽酸阿米洛利和氫氯噻嗪的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.432。