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免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn):第五節(jié) 細(xì)胞粘附分子的檢測(cè)

白細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞等以及血液中均存在細(xì)胞粘附分子。按其結(jié)構(gòu)特1瀀,分有鈣離子依賴性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和選擇素家族四大類。在各種細(xì)胞因子、內(nèi)毒素、凝血酶等作用下,細(xì)胞粘附分子由細(xì)胞內(nèi)貯存池轉(zhuǎn)移至細(xì)胞膜或合成增加,導(dǎo)w…

白細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞等以及血液中均存在細(xì)胞粘附分子。按其結(jié)構(gòu)特1瀀,分有鈣離子依賴性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和選擇素家族四大類。在各種細(xì)胞因子、內(nèi)毒素、凝血酶等作用下,細(xì)胞粘附分子由細(xì)胞內(nèi)貯存池轉(zhuǎn)移至細(xì)胞膜或合成增加,導(dǎo)www.med126.com致細(xì)胞表面的粘附分子數(shù)量增多。因此在某些疾病中細(xì)胞粘附分子的數(shù)量有改變。此外,細(xì)胞粘附分子經(jīng)磷酸化、糖基化等修飾作用可發(fā)生構(gòu)象改變,導(dǎo)致其親和力和擴(kuò)散速率改變而影響其功能,因此定量檢測(cè)細(xì)胞粘附分子的數(shù)量、親和力及擴(kuò)散速率對(duì)探索某些疾病的發(fā)病機(jī)制、監(jiān)視疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程和指導(dǎo)臨床治療有重要意義。目前的檢測(cè)方法,大多限于用免疫學(xué)技術(shù)檢測(cè)其數(shù)量,而有關(guān)分子的親和力及擴(kuò)散速率的檢測(cè)正在建立中。

一、細(xì)胞表面粘附分子的檢測(cè)

1.放射免疫測(cè)定法通常用抗細(xì)胞粘附分子抗體包被載體,加受檢樣品后,繼加相應(yīng)單克隆抗體和同位素標(biāo)記的二抗作非競(jìng)爭(zhēng)性固相放射免疫測(cè)定法。2.免疫熒光測(cè)定法除常規(guī)的間接免疫熒光法外,有條件的實(shí)驗(yàn)室,用不同激發(fā)波長(zhǎng)的熒光素著染色受檢細(xì)胞,在FACS儀上可同時(shí)檢測(cè)有兩種不同的細(xì)胞粘附分子。3.酶免疫測(cè)定法主要為雙抗體夾心ELISA,本法應(yīng)用最廣,但僅能檢出一群細(xì)胞的表面粘附分子數(shù)量,而不能反映單個(gè)細(xì)胞粘附分子數(shù)量的變化。

二、可溶性粘附分子的檢測(cè)

多采用雙抗體夾心ELISA,研究最多的選擇素家和免疫球蛋白超家族。前者有E、L、P三型,均可見(jiàn)血液中。溶血性尿毒癥和血小板減少性紫癜患者血液中,P選擇素比正常人高2~3倍,而敗血癥、HIV感染和艾滋病患者血液中L選擇素明顯增高。血液中存在可溶性E選擇素是內(nèi)皮細(xì)胞激活的證據(jù),敗血癥、糖尿病等患者血液中E選擇素水平增高,一般與疾病的活動(dòng)性無(wú)關(guān),而與器官受損程度相關(guān)。如敗血癥患者,可溶性E選擇素可增高20倍以上,據(jù)稱與疾病的嚴(yán)重性或預(yù)后有關(guān)。肝炎、肝硬化m.quanxiangyun.cn/yishi/等患者血液中超免疫球蛋白家族中ICAM-1水平增高,與肝功能損害指標(biāo)相關(guān)?傊,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)許多疾病可見(jiàn)細(xì)胞粘附分子數(shù)量的異常,但這類工作尚處于探索階段,有待深入研究和資料的積累才能判斷其確切的臨床意義。

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