（四)磁性分離法
1975年，Hersh報道了用磁化分離技術分離血清狄高辛放免測定的B、F后，受到了廣泛的重視。近年來國內(nèi)外許多學者對磁化顆粒的制備進行了系統(tǒng)地研究，應用于B與F的分離，并取得了引人注目的進展，使放免的B、F分離不再使用離心，縮短了放免操作時間，便于放免自動化測量。磁性分離的具體原理為血清樣品與標準品中的抗原與磁顆粒上的一定量的抗體反應，產(chǎn)生的抗原抗體磁性顆粒復合物，在磁場作用下沉降，使結(jié)合部分與游離部分分離。在磁性分離器上棄上清，進行測量。優(yōu)點是簡化了操作程序，B、F分離也較完全，穩(wěn)定性好。
目前常用的磁性分離技術除磁性固相抗體外，還有磁化活性炭吸附分離劑。
�。ㄎ�)固相包被分離法
近年來由于固相技術的研究使其固相所被（埋)技術發(fā)展迅速，再有固相包被具有簡便、快速、穩(wěn)定、不需離心等優(yōu)點，有逐漸取代液相法的趨勢。
1990年，Causse報告了活化塑料管新技術及生物素結(jié)合抗體、親和素標記物的應用，使放免技術對多數(shù)微量物質(zhì)的檢測可達到10-15g級水平，大大提高了放免測定的精確度、靈敏度。
抗體包被：物理吸附法—方法簡便，但包被量低。
價鍵結(jié)合法—需要纖維素、瓊脂等固相載體，操作復雜。
Causse活化塑料管新技術，提高了包被量，主要特點是將順丁烯二酸酐和苯乙烯的共聚體涂布試管，在試管壁形成一層活性薄膜（這種方法操作簡便)。
（六)雙抗體+PEG的分離法
這種分離方法利用雙抗體特異性強、PEG沉淀簡便快速的優(yōu)點，從而克服了雙抗體時間長、PEG方法非特異結(jié)合高的缺點。這一方面是當前分離技術中較理想的一種方法。
這種聯(lián)合方法分離方法減少了第二抗體的用量，PEG的最終濃度也只需2～4%，成本較低。這種方法既適用于蛋白質(zhì)、酶、大分子物質(zhì)，又適用于小分子肽等半抗原物質(zhì)。
1991年，北京中國同位素公司北方免疫試劑所采用80年代法國廣泛應用的雙抗體+PEG、再加一定劑量的γ球蛋白（免疫第二抗體時應用的γ球蛋白)的分離劑，溶解于磷酸緩沖液中，pH在7.4左右。這種分離劑推廣應用產(chǎn)生了很好的效果。沉淀完全，牢固，而非特異性結(jié)合低，時間短（加入分離劑15min后即可離心)，受溫度影響小，受到用戶的廣泛好評。
以上方法，要依據(jù)反應液中反應物分子量大小，酸堿度等特點，選擇合適的分離方法及分離劑。
